什麼是「DNA」，DNA看的見嗎?
大多數的細胞都具有細胞膜、細胞質和細胞核等構造，植物細胞在細胞膜的外圍還有細 胞壁。DNA 就存在細胞核當中，細胞核外層又有核膜，所以要萃取 DNA，要先破壞細胞膜及 核膜。膜的成份是磷脂質，可以用含有界面活性劑的清潔劑加以破壞。
我們可以用奇異果來進行DNA粗萃取的實驗，以下是實驗的步驟和原理
步驟1-果汁機打碎，目的是將細胞壁打碎。
步驟2-加入清潔劑：可透過清潔劑之界面活性劑(surfactant)的性質，將脂雙層的結構破壞，包含破壞細胞膜、核膜與胞器膜，使染色質釋出。
步驟3-加入高濃度食鹽水，目的是將DNA溶解於水溶液中。
步驟4-加入鳳梨汁利用鳳梨汁的蛋白酶，分解溶液中的蛋白質，包含與DNA結合的蛋白質。
步驟5-過濾：將其他未溶解的細胞碎片、蛋白質等雜質留在紗布上，使溶於水的DNA濾出。
步驟6-加入冰酒精：由於DNA不溶於有機溶劑，加入酒精可使DNA析出；溫度越低的酒精，析出效果越佳。
實驗程序:
製備奇異果汁：奇異果削皮後放入果汁機中 加 100 mL 蒸餾水攪碎 燒杯中
破壞果肉細胞： 果汁倒入 200 mL 燒杯中加 2.5 mL 洗碗精，用玻棒攪拌 勻，則細胞膜及核膜可破壞釋出染色體
溶解染色體： 上述混合液加5 M食鹽水（29.25 g NaCl＋100 mL 蒸餾水） 新鮮鳳梨汁，持續攪拌至少 5 分鐘。
純化 DNA： 上述混合液加 5 mL 新鮮鳳梨汁，再持續攪拌5分鐘。
收集 DNA 濾液：雙層紗布過濾混合液至100 mL 燒杯中(DNA 存在於濾液中）。
析出 DNA： 取 15 mL 濾液置入 50 mL乾淨燒杯中，沿著燒杯內壁，緩慢倒入30 mL 的 95 %冰酒精，溶液分層且在酒精與水的交界處出現白色雲狀物 即為DNA。
可以參考曹佳莉老師的影片，影片中說明了完整的實驗過程
https://www.youtube.com/watch?v=CoEMN_shKxg&ab_channel=LisaChuang
留言
張貼留言